核酸檢測哪些情況下會呈現假陽性?導致核酸假陽性的原因有哪些
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核酸檢測一般不會出現假陽性,出現假陽性的主要原因多是因爲標本污染,主要有以下幾種情況可能會導致核酸檢測出現假陽性:
1、標本污染
如果工作人員在收集標本時容器被污染,或者在放置標本時,如果容器密封不嚴病毒外泄,容器與容器之間會發生相互交叉污染。其次相關工作人員在提取核酸模板時,如果加樣器污染也會導致要本間發生污染的情況發生。
2、氣溶膠污染
空氣與離心機離心和液體表面進行摩擦時,由於操作比較劇烈,這次如果相關工作人員在反覆吸樣和開蓋時就會導致氣容膠發生污染。其次氣溶膠中的小顆粒會分散在實驗室的空氣中,可能會落到PCR儀、驗檯面、吸頭盒等地方,形成叉感染。
3、實驗室中克隆質粒污染
實驗室中的克隆質粒在被純化時需要的用具和試劑比較多,在活細胞內質粒,活細胞的繁殖速度更快,其生命力更強,如果此時造成污染,那麼也會導致核酸檢測假陽性。
4、PCR試劑污染
PCR試劑在調配的過程中,有可能被雙蒸水、加樣槍、容器等污染導致核酸出現假陽性的情況。
5、PCR擴增產物污染
PCR擴增產物污染是一種最常見的污染問題,PCR產物的拷貝量大於1013copy/mL,即使被很少量的PCR產物污染,就會導致假陽性的發生。
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